abberior MIRAVA POLYSCOPE 3D STED confocal 超解析螢光顯微鏡
ICOB Imaging Core｜儀器介紹、樣品準備、預約規範與收費標準
文件狀態：試營運草案
本頁預約與收費規範適用於試營運期間；如有調整，以設備管理人員公告為準。
一、儀器簡介
abberior MIRAVA POLYSCOPE 由德國 abberior instruments 開發，整合共軛焦顯微術（Confocal Microscopy）與受激放射耗損顯微術（Stimulated Emission Depletion, STED）。本機支援 Confocal、2D STED 與 3D STED 成像，可提升橫向（XY）及軸向（Z）的空間解析能力，適用於觀察細胞骨架、胞器、蛋白質分布，以及細胞或組織中的其他精細結構。
1.1 解析度參考
- 2D STED：橫向（XY）解析度可達約 20–30 nm。
- 3D STED：三維（XYZ）解析度可達約 60–90 nm；在理想條件下可達約 70 nm 的等向性（isotropic）解析度。
二、本機配置與進階功能
| 項目 | 本機配置 |
|---|---|
| 儀器型號 | abberior MIRAVA POLYSCOPE |
| 顯微鏡平台 | Olympus IX83 倒立式顯微鏡 |
| 成像模式 | Confocal、2D STED、3D STED |
| 激發雷射 | 405 nm（連續波，CW）；485、560、640 nm（脈衝式） |
| STED 耗損雷射 | 775 nm |
| 偵測器 | 三組 APD-based spectral detectors（APD 光譜偵測器） |
| 物鏡 | Olympus UPLXAPO 60×/1.42 NA，工作距離（WD）0.15 mm；Olympus UPLXAPO 60×/1.20 NA，工作距離（WD）0.28 mm |
| 進階功能 | FLEXPOSURE 自適應照明、RAYSHAPE 自適應光學、TRUESHARP 去卷積 |
| 操作軟體 | abberior LiGHTBOX |
2.1 進階影像技術
- FLEXPOSURE（自適應照明）：依影像訊號及結構調整照明，降低不必要的雷射照射與光漂白。
- RAYSHAPE（自適應光學）：補償光學像差，有助於改善厚樣品及 3D STED 成像品質。
- TRUESHARP（去卷積）：用於影像去卷積與細節增強。若影像將用於定量分析，建議同時保留原始影像與處理參數。
三、STED 樣品準備建議
本機現階段尚未配置活細胞培養所需的環境控制系統，建議以固定樣品（fixed samples）成像為主。製作 STED 樣品前，建議先與設備管理人員確認染劑、物鏡、樣品厚度及封片條件。
3.1 螢光染劑與激發波長
下列為適合優先評估的染劑組合。三種 STAR 染劑均可搭配本機 775 nm STED 耗損雷射。
| 螢光染劑 | 激發波長 | 成像說明 |
|---|---|---|
| abberior STAR RED | 640 nm | 可用於 Confocal 及 STED |
| abberior STAR ORANGE | 560 nm | 可用於 Confocal 及 STED |
| abberior STAR 460L | 485 nm | 可用於 Confocal 及 STED |
| DAPI／Hoechst | 405 nm | 僅供 Confocal 成像；不適用本機 775 nm STED 成像 |
3.2 封片介質與蓋玻片
| 項目 | 建議與注意事項 |
|---|---|
| 2D STED 封片介質 | abberior MOUNT SOLID ANTIFADE（原廠建議選項，需時間固化）。 |
| 3D STED 封片介質 | abberior MOUNT LIQUID ANTIFADE（非硬化型；原廠建議選項，需以指甲油或封片膠於蓋玻片四周封片）。 |
| 蓋玻片 | 建議使用 No. 1.5H 高精度玻璃蓋玻片，標稱厚度 170 µm |
四、使用方式與收費
本設備依使用資格、操作方式及使用時段，分為下列三種情況：
| 使用方式 | 使用資格／時段 | 預約方式 | 費用 |
|---|---|---|---|
| 認證使用者自行操作：上班時間 | 全院已取得本機操作認證的使用者；08:00–17:00 | IIS儀器預約系統項目(細生所)：Abberior Mirava Polyscope (3D STED Confocal) |
NT$500／小時 |
| 認證使用者自行操作：非上班時間 | 僅限細生所已取得本機操作認證的使用者 | IIS儀器預約系統項目(細生所)：Abberior Mirava Polyscope (Non-working time) |
NT$250／小時 |
| 設備管理人員協助操作／教育訓練 | 尚未認證或需要人員協助者；須事先協調 | 同時以 E-mail 聯繫兩位設備管理人員 | NT$1,000／小時 |
五、上班時間預約時程與優先額度
5.1 預約採「優先預約單位可提前預約下一週次保留時段，當週時段全院開放」
| 申請單位 | 欲使用的週次 | 可預約對象與規則 |
|---|---|---|
| 優先預約單位 | 二週內 | 各優先預約單位的認證使用者，可預約兩週內的儀器使用時段。其中，次一週的預約時數計入該單位的優先預約額度；當週的預約時數則不計入。 |
| 院內其他單位 | 當週 | 當週尚未被預約的剩餘時段，開放全院認證使用者預約。 |
5.2 預約週次對照表
下表以連續三週為例：左側是提出申請的週次，上方是希望使用儀器的週次。
| 使用週次 → 申請週次 ↓ |
第一週 | 第二週 | 第三週 | 第四週 |
|---|---|---|---|---|
| 第一週 | 全院開放 | 優先預約單位 | — | — |
| 第二週 | — | 全院開放 | 優先預約單位 | — |
| 第三週 | — | — | 全院開放 | 優先預約單位 |
5.3 優先預約單位每週優先預約額度
各優先預約單位可於前一週，依下列額度提前預約下一週的上班時間時段。
| 優先預約單位 | 優先保留時數／週 |
|---|---|
| 細生所 | 6 小時 |
| 分生所 | 3 小時 |
| 生醫所 | 3 小時 |
| 植微所 | 3 小時 |
| 生化所 | 2 小時 |
| 基因體 | 2 小時 |
| 合計 | 19 小時 |
5.4 單一實驗室上限與審核
- 單一實驗室每週上班時間預約總時數以 4 小時為上限，包含優先預約與當週預約。
- 請統一使用實驗室 IIS 帳號預約，以利核對實驗室及所屬單位的預約時數。
- 試營運期間，設備管理人員於每週一下午進行預約審核；遇國定假日則順延至下一上班日。
- 設備管理人員將依預約紀錄核對使用資格及時數；不符規範的預約可能需要調整或退件。
5.5 非上班時間的使用
- 僅開放細生所已取得本機操作認證的使用者預約並自行操作。
- 使用系統項目：
Abberior Mirava Polyscope (Non-working time)。 - 費用為 NT$250／小時。
- 非上班時間的使用時數不計入各優先預約單位上班時間的每週優先保留額度。
六、如何提出預約或申請協助
6.1 已認證使用者：自行預約
- 確認自己已取得本設備的操作認證，且欲預約的時段符合使用資格。
- 確認欲使用的週次：下一週依優先預約單位的保留額度優先開放；當週剩餘時段開放全院。
- 前往中央研究院儀器預約系統，使用「設備預約」功能，並選擇適用項目：
- 上班時間：
Abberior Mirava Polyscope (3D STED Confocal) - 非上班時間：
Abberior Mirava Polyscope (Non-working time)
- 上班時間：
- 請使用實驗室 IIS 帳號（請勿使用個人 IIS 帳號）完成預約，並遵守適用的時數限制與審核結果。
6.2 協助操作／教育訓練：事先聯絡管理人員
如需設備管理人員協助操作，或申請本設備教育訓練，請同時以 E-mail 聯繫以下兩位設備管理人員，以利時間安排：
- 林伯彥：pylin@as.edu.tw
- 朱韋臣：weichen01@as.edu.tw
- 費用：NT$1,000／小時。
- 實際安排需配合設備可用時段、優先預約單位的保留時數及設備管理人員的可用時段。建議來信時簡述樣品類型、螢光染劑、封片介質、期望的成像模式（Confocal／2D STED／3D STED），以及預計使用時間。
參考資料
原廠技術參考：